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雙檢測模式超微量分光光度計(jì)試用

來源: 發(fā)布時(shí)間:2024-01-17

Micro Drop比色皿檢測基本操作:
1. 準(zhǔn)備好兩個(gè)比色皿,一個(gè)加入空白檢測液,一個(gè)加入樣品,保證加入的液體量足夠,能蓋過光束,光束(2mm寬)位置在比色皿底部以上8.5mm的位置,請(qǐng)按照比色皿生產(chǎn)廠家的建議加入液體。
2. 抬起樣品臂,把比色皿插入到儀器中,插入比色皿時(shí)要注意透光面,與儀器上面的光路指向的方向相對(duì)應(yīng)。
3. 在做比色皿檢測時(shí)樣品臂必須放下來。
4. 在Micro Drop軟件上的“選項(xiàng)”框中選擇“使用比色皿”, 插入比色皿,勾選基線校正,設(shè)置相應(yīng)參數(shù)進(jìn)行空白檢測及檢測。
5. 當(dāng)檢測完成后,移出比色皿,倒出樣品,清洗干凈比色皿。
Micro Drop可以檢測45-48mm的10mm光程的比色皿。雙檢測模式超微量分光光度計(jì)試用

超微量分光光度計(jì)比色法測定蛋白質(zhì)濃度:BCA法:這是一種較新的、更敏感的蛋白測試法。要分析的蛋白在堿性溶液里與Cu2+反應(yīng)產(chǎn)生Cu+,后者與BCA形成螯合物,形成紫色化合物,吸收峰在562nm波長。此化合物與蛋白濃度的線性關(guān)系極強(qiáng),反應(yīng)后形成的化合物非常穩(wěn)定。相對(duì)于Lowry法,操作簡單,敏感度高。但是與Lowry法相似的是容易受到蛋白質(zhì)之間以及去污劑的干擾。Bradford法:這種方法的原理是蛋白質(zhì)與考馬斯亮蘭結(jié)合反應(yīng),產(chǎn)生的有色化合物吸收峰595nm。其比較大的特點(diǎn)是,敏感度好,是Lowry和BCA兩種測試方法的2倍;操作更簡單,速度更快;只需要一種反應(yīng)試劑;化合物可以穩(wěn)定1小時(shí),方便結(jié)果;而且與一系列干擾Lowry,BCA反應(yīng)的還原劑(如DTT,巰基乙醇)相容。但是對(duì)于去污劑依然是敏感的。**主要的缺點(diǎn)是不同的標(biāo)準(zhǔn)品會(huì)導(dǎo)致同一樣品的結(jié)果差異較大,無可比性。江西超微量分光光度計(jì)廠家直銷不同物質(zhì)的吸收光譜是不同的.因此根據(jù)吸收光譜,可以鑒別溶液中所含的物質(zhì)。

光譜儀和分光光度計(jì)有什么區(qū)別?使用光譜進(jìn)行定性分析的儀器叫做光譜儀。 使用分光棱鏡或者光柵產(chǎn)生光譜,并利用其中特定的某個(gè)或某段光譜線強(qiáng)度來進(jìn)行定量分析的儀器叫做分光光度計(jì)。這兩種叫法基本沒差別,光譜儀都是要有分光組件的,比如ICP-AES, AAS。 但是歷史上因?yàn)橹袊虾>軆x器廠首先將紫外可見分光光度計(jì)進(jìn)行了國產(chǎn)化,當(dāng)時(shí)的技術(shù)難點(diǎn)也就在分光技術(shù)上。老一代的分析員都是把紫外可見分光光度計(jì)直接稱作分光光度計(jì),所以分光光度計(jì)也特指紫外可見分光光度計(jì)。而熒光光譜儀、核磁共振光譜儀、掃描隧道光譜儀其實(shí)也是要有分光組件的,現(xiàn)在都是用光譜儀這個(gè)名詞來統(tǒng)稱了,因此光譜儀的概念比分光光度計(jì)范圍要大一些,新一些。而分光光度計(jì)更集中在定量分析方面的稱呼,有人把AES、AAS也稱作分光光度計(jì)因?yàn)樗鼈冊谝话阈缘姆治龉ぷ髦幸仓饕怯脕矶康?,這就造成了“分光光度計(jì)”和“光譜儀”兩種叫法的混亂。

分光光度計(jì)采用一個(gè)可以產(chǎn)生多個(gè)波長的光源,通過系列分光裝置,從而產(chǎn)生特定波長的光源,光線透過測試的樣品后,部分光線被吸收,計(jì)算樣品的吸光值,從而轉(zhuǎn)化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。單色光輻射穿過被測物質(zhì)溶液時(shí),被該物質(zhì)吸收的量與該物質(zhì)的濃度和液層的厚度(光路長度)成正比,其關(guān)系如下式:A=-lg(I/I0)=-lgT=kLc式中 :A 為吸光度;I0為入射的單色光強(qiáng)度;I 為透射的單色光強(qiáng)度;T 為物質(zhì)的透射率;k 為摩爾吸收系數(shù);L 為被分析物質(zhì)的光程,即比色皿的邊長;c 為物質(zhì)的濃度;物質(zhì)對(duì)光的選擇性吸收波長,以及相應(yīng)的吸收系數(shù)是該物質(zhì)的物理常數(shù)。當(dāng)已知某純物質(zhì)在一定條件下的吸收系數(shù)后可用同樣條件將該供試品配成溶液,測定其吸收度,即可由上式計(jì)算出供試品中該物質(zhì)的含量。在可見光區(qū),除某些物質(zhì)對(duì)光有吸收外,很多物質(zhì)本身并沒有吸收但可在一定條件下加入顯色試劑或經(jīng)過處理使其顯色后再測定,故又稱比色分析。由于顯色時(shí)影響呈色深淺的因素較多,且常使用單色光純度較差的儀器,故測定時(shí)應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)品或?qū)φ掌吠瑫r(shí)操作。Bradford法的原理是蛋白質(zhì)與考馬斯亮蘭結(jié)合反應(yīng)。

超微量分光光度計(jì)比色法測定蛋白質(zhì)濃度:
BCA法:這是一種較新的、更敏感的蛋白測試法。要分析的蛋白在堿性溶液里與Cu2+反應(yīng)產(chǎn)生Cu+,后者與BCA形成螯合物,形成紫色化合物,吸收峰在562nm波長。此化合物與蛋白濃度的線性關(guān)系極強(qiáng),反應(yīng)后形成的化合物非常穩(wěn)定。相對(duì)于Lowry法,操作簡單,敏感度高。但是與Lowry法相似的是容易受到蛋白質(zhì)之間以及去污劑的干擾。
Bradford法:這種方法的原理是蛋白質(zhì)與考馬斯亮蘭結(jié)合反應(yīng),產(chǎn)生的有色化合物吸收峰595nm。其比較大的特點(diǎn)是,敏感度好,是Lowry和BCA兩種測試方法的2倍;操作更簡單,速度更快;只需要一種反應(yīng)試劑;化合物可以穩(wěn)定1小時(shí),方便結(jié)果;而且與一系列干擾Lowry,BCA反應(yīng)的還原劑(如DTT,巰基乙醇)相容。但是對(duì)于去污劑依然是敏感的。**主要的缺點(diǎn)是不同的標(biāo)準(zhǔn)品會(huì)導(dǎo)致同一樣品的結(jié)果差異較大,無可比性。
消光系數(shù)是被測溶液對(duì)光的吸收大小值。安徽高重復(fù)性超微量分光光度計(jì)廠家直銷

ε 摩爾吸光系數(shù)(Lmol-1cm-1),它與吸收物質(zhì)的性質(zhì)及入射光的波長λ有關(guān)。雙檢測模式超微量分光光度計(jì)試用

在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域,超微量分光光度計(jì)常被用于研究生物大分子的結(jié)構(gòu)和功能。例如,通過測量核酸的吸光度,可以推斷出其含量和純度。同樣,通過測量蛋白質(zhì)的吸光度,可以了解蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和折疊情況。此外,超微量分光光度計(jì)還可用于監(jiān)測細(xì)菌生長過程中的生理變化,為藥物的開發(fā)提供了有力的幫助。在化學(xué)領(lǐng)域,超微量分光光度計(jì)也被廣泛應(yīng)用于樣品的定量和定性分析。其高靈敏度和寬廣的動(dòng)態(tài)范圍使得即使是對(duì)痕量元素的分析也成為可能。此外,超微量分光光度計(jì)還可以通過光譜對(duì)比的方法,對(duì)不同樣品進(jìn)行鑒別和分類,這對(duì)于地質(zhì)學(xué)、材料科學(xué)等領(lǐng)域具有重要意義。雙檢測模式超微量分光光度計(jì)試用