在遺傳學(xué)上,一般是通過染色體的數(shù)量來確定植物的倍性,隨著科技的發(fā)展,目前植物倍性鑒定有多種方法。在形態(tài)學(xué)層次上,觀察不同倍體植株的形態(tài)特征的差異,可間接確定植株的倍性,但準(zhǔn)確性不夠高,而且要在植株生長(zhǎng)發(fā)育的特定時(shí)期才能鑒定,往往難以及時(shí)采取染色體加倍措施,致使育種材料不能得到及時(shí)利用,故常不被采用。在分子生物學(xué)層次上,利用流式細(xì)胞儀測(cè)定植物基因組DNA含量,即C值的大小,也可直接確定再生植株的倍性。由于該方法所用的儀器設(shè)備昂貴,普通實(shí)驗(yàn)室難以具備,故制約了該方法的應(yīng)用和推廣。在細(xì)胞學(xué)層次上,有染色體計(jì)數(shù)直接鑒定方法和葉片保衛(wèi)細(xì)胞葉綠體計(jì)數(shù)間接鑒定法。染色體計(jì)數(shù)法準(zhǔn)確、可靠,但費(fèi)時(shí)而且需要熟練的細(xì)胞學(xué)操作技術(shù)。免疫表型是流式細(xì)胞術(shù)中較常用的應(yīng)用。它利用流式細(xì)胞術(shù)的獨(dú)特能力來同時(shí)分析混合細(xì)胞群的多個(gè)參數(shù)。珠三角CyFlow系列倍性分析儀原理
流式細(xì)胞儀主要由流動(dòng)室及液流系統(tǒng)、激光器及光學(xué)系統(tǒng)、光電管及檢測(cè)系統(tǒng)、計(jì)算機(jī)及分析系統(tǒng)組成。流式細(xì)胞儀的流體系統(tǒng)負(fù)責(zé)將樣品從樣品管轉(zhuǎn)移到流動(dòng)池。一旦通過流動(dòng)池(并通過激光束),樣品將被分選出來(在細(xì)胞分選儀中)或移到廢液中。光學(xué)系統(tǒng)的元件包括激發(fā)光源、透鏡和濾光片(用于收集和移動(dòng)儀器周圍的光)以及用于產(chǎn)生光電流的檢測(cè)系統(tǒng)。電子系統(tǒng)是流式細(xì)胞儀的大腦。在這里,來自檢測(cè)器的光電流經(jīng)過數(shù)字化、處理和保存,以用于后續(xù)分析。珠三角CyFlow系列倍性分析儀原理CyFlow Analyser倍性分析儀內(nèi)置15TFT液晶顯示屏提供兩種不同的波長(zhǎng)獨(dú)特的儀器設(shè)計(jì)。
CyFlow Analyser倍性分析儀的特點(diǎn):1、方便快捷(倍體和基因組大小分析時(shí)間小于1分鐘、無需對(duì)中期染色體進(jìn)行制備和染色、取代了耗時(shí)的顯微鏡鏡檢、Sysmex-Partec簡(jiǎn)單快捷的樣品制備過程、可選擇96型孔板或120離心管的自動(dòng)進(jìn)樣系統(tǒng))2、多功能性(任何植物樣品均可被檢測(cè)分析:葉、秧苗、根莖、花、種子等)3、高精確性(絕大多數(shù)動(dòng)植物倍體檢測(cè)精度可以達(dá)到±1條染色體)4、靈活便捷(結(jié)構(gòu)緊湊,便于移動(dòng),適用于多種工作場(chǎng)所)5、獨(dú)特的儀器設(shè)計(jì)6、內(nèi)置15TFT液晶顯示屏7、提供兩種不同的波8、直觀強(qiáng)大的FCM軟件系統(tǒng)。
細(xì)胞核DNA含量和基因組大小對(duì)于研究生物的多樣性至關(guān)重要,尤其是在基礎(chǔ)植物學(xué)和應(yīng)用植物學(xué)等多個(gè)研究領(lǐng)域。這些研究的基礎(chǔ)是細(xì)胞的內(nèi)多倍化(即C值)。細(xì)胞的內(nèi)多倍化**了細(xì)胞核內(nèi)DNA含量倍增,指的是同一個(gè)體內(nèi)相鄰體細(xì)胞具有多種倍性的細(xì)胞核現(xiàn)象,由細(xì)胞內(nèi)復(fù)制產(chǎn)生。細(xì)胞內(nèi)多倍化在真核生物中普遍存在,尤其在植物中變化范圍較大,對(duì)研究個(gè)體的生長(zhǎng)發(fā)育具有重要的生物學(xué)意義。盡管C值非常重要,但是目前已知C值的植物品種*占所有植物品種的一小部分?;诹魇降臋z測(cè)技術(shù)簡(jiǎn)單、快速、準(zhǔn)確、可靠,目前該技術(shù)已作為測(cè)定植物勻漿中C值的優(yōu)先方法,并且在植物學(xué)中的應(yīng)用越來越范圍廣。流式倍性分析儀可以實(shí)現(xiàn)2分鐘內(nèi)完成動(dòng)物細(xì)胞及植物樣本的染色制備及上機(jī)檢測(cè)。
利用流式細(xì)胞儀快速檢測(cè)棉花 DNA 倍性,為棉花的倍性鑒定和育種研究提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。以陸地棉珂字棉 312( Gossypium hirsutumLinn.)的老葉和嫩葉為試材,用 WPB 和 LB01 解離液提取細(xì)胞核,經(jīng) PI 染色后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞倍性。結(jié)果發(fā)現(xiàn),用 WPB 解離液提取棉花嫩葉獲得的細(xì)胞核用于倍性檢測(cè)效果更好,表現(xiàn)為主峰離子團(tuán)清晰而集中、背景碎片少,可以得到明顯的主峰、雜峰更少,且收集到的細(xì)胞核數(shù)目更多。初步建立了利用流式細(xì)胞儀快速檢測(cè)棉花 DNA 倍性的方法。CyFlow Analyser倍性分析儀 染色速度快:DNA倍體標(biāo)本上機(jī)檢測(cè)小于2分鐘。珠三角配備365nm光源倍性分析儀CyFlow分選系統(tǒng)
流式細(xì)胞分析是一種現(xiàn)代分析技術(shù),其在生物學(xué)和醫(yī)學(xué)領(lǐng)域被范圍廣使用,具有“實(shí)驗(yàn)室的 CT”之稱。珠三角CyFlow系列倍性分析儀原理
流式細(xì)胞分析是一種現(xiàn)代分析技術(shù),其在生物學(xué)和醫(yī)學(xué)領(lǐng)域被范圍廣使用,具有“實(shí)驗(yàn)室的 CT”之稱。雖然流式細(xì)胞術(shù)在植物研究中起步較晚,但由于它具有制樣簡(jiǎn)單用量少、操作高效快速且數(shù)據(jù)重復(fù)性高等優(yōu)勢(shì),已逐漸發(fā)展為一種常用的植物基因組大小或植物倍性研究方法。植物的核 DNA 含量和倍性水平是植物學(xué)研究中重要的基礎(chǔ)研究指標(biāo)。流式細(xì)胞術(shù)的應(yīng)用,提高了植物核 DNA 含量檢測(cè)的準(zhǔn)確度和檢測(cè)速度.流式細(xì)胞儀克服了傳統(tǒng)鑒定方法操作難、時(shí)間長(zhǎng)等不足,可進(jìn)行快速、大量的染色體倍性分析,為后續(xù)棉花倍性育種提供技術(shù)支撐。珠三角CyFlow系列倍性分析儀原理
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