枯草芽孢桿菌是當(dāng)今工業(yè)酶生應(yīng)用較普遍的菌種之一,據(jù)不完全統(tǒng)計(jì),枯草芽孢桿菌所產(chǎn)的酶占整個(gè)酶市場(chǎng)的50%。由于其產(chǎn)酶量高、種類多、安全性好和環(huán)保等優(yōu)點(diǎn),在現(xiàn)代工業(yè)生產(chǎn)中被普遍用作生產(chǎn)菌種,其發(fā)酵生產(chǎn)的酶已在食品、飼料、洗滌、紡織、皮革、造紙和醫(yī)藥等領(lǐng)域均發(fā)揮著十分重要的作用。枯草芽孢桿菌作為植物病害生防細(xì)菌之一,具有較強(qiáng)的防病作用。用于防治多種作物的霜露病、疫病、灰霉病等病害。枯草芽孢桿菌作為基因工程受體菌,可表達(dá)出近200種原核和真核生物來(lái)源的蛋白基因,并且無(wú)論是在生產(chǎn)上還是對(duì)基因組及物理圖譜的研究上都處于中心位置,對(duì)它的研究涉及各個(gè)方面。金黃色葡萄球可以直接用于繼續(xù)傳代,用來(lái)做上述應(yīng)用。暗棕灰產(chǎn)色鏈霉菌菌種
對(duì)銅綠假單胞桿菌的復(fù)蘇,要先準(zhǔn)備一個(gè)茶缸或1000毫升的燒壞,內(nèi)裝2/3杯37攝氏度的溫水。從液氮中取出凍存管、迅速置于溫水中并不斷攪動(dòng)。使凍存管中的凍存物在1分鐘之內(nèi)融化。打開(kāi)凍存管,將細(xì)胞懸液吸到離心管中。1000rpm離心10分鐘,棄去上清液。沉淀加10毫升培養(yǎng)液,吹打均勻,再離心10分鐘,棄上清液。加適當(dāng)培養(yǎng)基后將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中,37攝氏度培養(yǎng),第二天觀察生長(zhǎng)情況。器材通常為液氮罐、凍存管(塑料螺口凍存管或安瓿瓶)、離心管、吸管、離心機(jī)等。試劑通常為0.25%胰酶、培養(yǎng)基、含保護(hù)劑的培養(yǎng)基(即凍存液)。凍存液配制是培養(yǎng)基加入甘油或DSMO,使其終濃度達(dá)5—20%。保護(hù)劑的種類和用量視不同細(xì)胞而不同。配好后4攝氏度下保存。粗糙鏈孢霉金黃色葡萄球是常見(jiàn)的化膿性球菌,是醫(yī)院交叉?zhèn)魅镜闹匾獊?lái)源。
大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)是目前應(yīng)用很廣的蛋白表達(dá)系統(tǒng)。它具有:遺傳背景清楚。易于培養(yǎng)和控制。轉(zhuǎn)化操作簡(jiǎn)單。表達(dá)水平高。成本低。周期短等特點(diǎn)。同時(shí)是常用也是經(jīng)濟(jì)實(shí)惠的蛋白表達(dá)系統(tǒng),在基因表達(dá)技術(shù)中發(fā)展至早。Escherich于1885年發(fā)現(xiàn)大腸桿菌。1976年Struhl、1977年Vapnek及1978年Chang等分別將酵母DN段、粗糙鏈孢霉DN段和哺乳動(dòng)物cDN段導(dǎo)入大腸桿菌,引起其表型的改變,證明了外源基因在大腸桿菌中可以使現(xiàn)有功能的活性表達(dá)。這些研究為大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)的發(fā)展奠定了理論基礎(chǔ)。1980年,Guarante等在Science雜志上發(fā)表了以質(zhì)粒、乳糖操縱子為基礎(chǔ)建立起來(lái)的大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)。這一發(fā)展構(gòu)成大腸桿菌系統(tǒng)的雛形。
不同標(biāo)本來(lái)源金黃色葡萄球菌的MRSA分離率和耐藥分析:導(dǎo)管、痰液、血液、膿液、分泌物MRGSA的分離率分別是66.7%、55.6%、51.7%、40.0%、38.9%,導(dǎo)管的MRSA分離率明顯高于血液、膿液、分泌物,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05).分泌物、膿液與血液的MRSA分離率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05).除萬(wàn)古霉素、奎奴普丁/達(dá)福普汀、呋喃妥因外,導(dǎo)管分離株對(duì)常用抑菌藥物的耐藥率較高(P<0.05),其次是痰液、血液,而分泌物與膿液較低(P<0.05)。痰液與血液對(duì)多數(shù)常用抑菌藥物的耐藥率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05).分泌物分離株對(duì)慶大霉素、左氧氟沙星、復(fù)方磺胺甲噁唑、米諾環(huán)素的耐藥率明顯低于導(dǎo)管、痰液、血液分離株的耐藥率(P<0.05)。金黃色葡萄球可制成傳染鋼片和染菌布片。
腸毒大腸桿菌是大多數(shù)疫苗開(kāi)發(fā)工作所關(guān)注的大腸桿菌類型。針對(duì)腸毒大腸桿菌的不耐熱腸毒和主要定居因子的抗體提供了對(duì)產(chǎn)生不耐熱腸毒、表達(dá)同源定居因子的腸毒大腸桿菌的保護(hù)。已經(jīng)開(kāi)發(fā)了由毒抗原和全細(xì)胞組成的口服滅活疫苗,即許可的重組霍亂B亞單位(rCTB)-WC霍亂疫苗Dukoral。腸毒大腸桿菌目前沒(méi)有獲得許可的疫苗,盡管有幾種疫苗處于不同的開(kāi)發(fā)階段。在不同的試驗(yàn)中,rCTB-WC霍亂疫苗提供了很高(85–100%)的短期保護(hù)。一種口服腸毒大腸桿菌候選疫苗由rCTB和表達(dá)主要定居因子的福爾馬林滅活大腸桿菌組成,臨床試驗(yàn)表明該疫苗對(duì)美國(guó)旅行者的嚴(yán)重腹瀉是安全的、免疫原性的和有效的,但對(duì)埃及兒童的腸毒大腸桿菌腹瀉無(wú)效。一種由過(guò)表達(dá)定居因子的重組大腸桿菌株和一種更類似不耐熱腸毒的混合類毒LCTBA組成的改良腸毒大腸桿菌疫苗正在進(jìn)行臨床試驗(yàn)。銅綠假單胞菌的O抗原包含外膜蛋白,為保護(hù)性抗原。暗棕灰產(chǎn)色鏈霉菌菌種
枯草芽孢桿菌定殖、繁殖速度更快。暗棕灰產(chǎn)色鏈霉菌菌種
銅綠假單胞菌的固態(tài)發(fā)酵是一種培養(yǎng)基呈固態(tài)、培養(yǎng)基中沒(méi)有或幾乎沒(méi)有自由流動(dòng)水、利用自然底物作為碳源和能源或利用惰性底物作為支持物的發(fā)酵過(guò)程。但是工藝生產(chǎn)周期長(zhǎng);但是營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)量濃度存在梯度,發(fā)酵不均勻,菌體的生長(zhǎng)、對(duì)營(yíng)養(yǎng)物的吸收和代謝產(chǎn)物的分泌存在不均勻,故目前不作為主要的工業(yè)生產(chǎn)方式。液固兩相發(fā)酵是指,首先通過(guò)液體發(fā)酵快速生產(chǎn)大量高活力的菌絲體作為種子,再將其通過(guò)密閉管道,由壓力釜接種到固體發(fā)酵罐中進(jìn)行固體發(fā)酵,使其產(chǎn)生較接近自然接種體形態(tài)的孢子。銅綠假單胞菌的液態(tài)發(fā)酵是釆用現(xiàn)代發(fā)酵技術(shù),將目標(biāo)微生物菌種接種到生物反應(yīng)器中進(jìn)行通風(fēng)的深層液體培養(yǎng)。暗棕灰產(chǎn)色鏈霉菌菌種
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