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細(xì)胞分泌到細(xì)胞外環(huán)境中分別稱(chēng)為外泌體和微泡的細(xì)胞外膜泡是內(nèi)源性和質(zhì)膜起源的不同類(lèi)型的膜囊泡。這些細(xì)胞外囊泡（EVs）表示了細(xì)胞間通訊的一個(gè)重要模式，作為膜和細(xì)胞溶質(zhì)蛋白、脂質(zhì)和RNA細(xì)胞之間傳遞的載體。然而，我們對(duì)于EV形成的分子機(jī)制知識(shí)的缺乏以及缺乏干擾貨物包裝或囊泡釋放的方法仍然妨礙了其在體內(nèi)生理相關(guān)性的探索。這篇綜述專(zhuān)注于EV的特性和目前提出的形成、定位和功能的機(jī)制。該綜述描述了將外泌體定義為特定的分泌囊泡群體的物理性質(zhì)，總結(jié)了其生物學(xué)效應(yīng)，特別是免疫系統(tǒng)，討論了分泌囊泡可能作為細(xì)胞間信使的潛在作用。神經(jīng)細(xì)胞來(lái)源的外泌體含有與神經(jīng)退行性疾病相關(guān)的分子。外泌體的分離外泌體基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)和臨床應(yīng)用...

circZKSCAN1在肝ai細(xì)胞中低表達(dá)且抑制肝ai細(xì)胞的增殖，ciRS-7則被認(rèn)為是非小細(xì)胞肺ai、結(jié)腸ai和胃ai等中流的預(yù)后指標(biāo)，其高表達(dá)與較高的臨床分期和較差的總體生存期相關(guān)。目前已發(fā)現(xiàn)組織、血液和外泌體中的circRNA分子表達(dá)失調(diào)，而多種circRNA的聯(lián)合檢測(cè)會(huì)提高外泌體標(biāo)志物的敏感性和特異性，甚至可達(dá)到90％左右。外泌體可作為納米載體來(lái)介導(dǎo)細(xì)胞間的信息傳遞，發(fā)揮信息傳遞作用的方式主要有：在細(xì)胞間轉(zhuǎn)移受體，通過(guò)配體受體介導(dǎo)的方式作用于受體細(xì)胞，向受體細(xì)胞轉(zhuǎn)移功能蛋白，通過(guò)膜融合方式向受體細(xì)胞傳遞mRNA、miRNAs或轉(zhuǎn)錄因子等信息。這些方式為中流靶向zhiliao開(kāi)辟了新的途...

外泌體mirRNA和蛋白質(zhì)被認(rèn)為是NSCLC的預(yù)后因子。Dejima等在研究NSCLC患者預(yù)后的生物標(biāo)志物時(shí)發(fā)現(xiàn)，外泌體miR-4257和miR-21的含量顯著上升。此外，還有研究表明，低水平miR-146a-5p的NSCLC患者較高水平miR-146a-5p的NSCLC患者有更高的復(fù)發(fā)率。Sandfeld-Paulsen等在研究276例NSCLC患者血漿的外泌體時(shí)發(fā)現(xiàn)，NY-ESO-1是單獨(dú)對(duì)低生存率有顯著影響的標(biāo)志物。Silva等利用TaqMan低密度芯片的方法系統(tǒng)分析了28位NSCLC患者體內(nèi)的365種miRNA，其中l(wèi)et-7f、miR-30e-3p和miR-20b表達(dá)均下調(diào)，進(jìn)一步研...

除了siRNA和miRNA，mRNA也可以作為“貨物”被外泌體運(yùn)輸。研究表明，在移植了人肺中流的小鼠模型的血液和唾液中分離出來(lái)的外泌體含有中流細(xì)胞特異性的mRNA，而被愛(ài)潑斯坦-巴爾病毒(EBV)感ran的細(xì)胞分泌的外泌體中也含有EBV的潛伏期mRNA。因而，外泌體的這種運(yùn)載mRNA的能力引起了中流研究者們的注意。近期，Saydam等率先報(bào)道了利用多泡體(含外泌體)負(fù)載mRNA/蛋白進(jìn)行中流zhiliao的研究。研究者們利用脂質(zhì)體2000或病毒載體對(duì)HEK-293細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染，使其分泌的多泡體含有mRNA/蛋白(CD-UPRTEGFP，其中CD:胞嘧啶脫氨酶;UPＲT:尿嘧啶磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶;E...

外泌體是指包含了復(fù)雜RNA和蛋白質(zhì)的小膜泡(30-150nm)，現(xiàn)今，其特指直徑在40-100nm的盤(pán)狀囊泡。多種細(xì)胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體。其主要來(lái)源于細(xì)胞內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體，經(jīng)多囊泡體外膜與細(xì)胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中?，F(xiàn)在外泌體特指直徑在40-100nm的盤(pán)狀囊泡。多種細(xì)胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體。其主要來(lái)源于細(xì)胞內(nèi)內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體，經(jīng)多囊泡體外膜與細(xì)胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中。隨著今后的研究發(fā)展，外泌體功能逐步清晰，并擴(kuò)大臨床應(yīng)用。打完外泌體后注意事項(xiàng)外泌體調(diào)控毛發(fā)根部的囊干細(xì)胞的機(jī)能，延長(zhǎng)毛發(fā)根部的囊生長(zhǎng)期，同時(shí)活化處于靜止期的毛發(fā)根部的囊...

妊娠期間胎盤(pán)可釋放外泌體到全身循環(huán)系統(tǒng)，參與妊娠期間母胎界面的免疫調(diào)節(jié)、子宮螺旋動(dòng)脈重塑和胎盤(pán)屏障的形成等重要事件調(diào)控，在正常妊娠過(guò)程維持中發(fā)揮重要作用。而很多妊娠并發(fā)癥，如子癇前期等胎盤(pán)功能紊亂相關(guān)疾病的發(fā)生，很可能與胎盤(pán)來(lái)源外泌體異常密切相關(guān)。目前外泌體分離方法主要包括：多步差速離心、蔗糖密度梯度離心、試劑盒沉淀、免疫磁珠分選、色譜法、過(guò)濾離心等方法。其中，多步差速離心是制備外泌體的經(jīng)典方法，該方法是根據(jù)外泌體的沉降系數(shù)差速離心將其分離出來(lái)，然而妊娠期母血清中除含有胎盤(pán)組織釋放的外泌體，還包括許多其他種類(lèi)細(xì)胞釋放的外泌體，如樹(shù)突狀細(xì)胞、淋巴細(xì)胞等，且血清中可能還存在一些大小類(lèi)似的物質(zhì)混雜其...

獲得囊泡粒徑分布的兩種方法動(dòng)態(tài)光散射(DLS)和納米顆粒跟蹤分析(NTA)都被廣fan應(yīng)用于外泌體顆粒數(shù)目和粒徑分布的測(cè)量，但兩種方法也各有不足。動(dòng)態(tài)光散射法中散射光強(qiáng)度依賴于顆粒質(zhì)量(體積)，混合體系中大囊泡的存在(即使只有很少的量)將嚴(yán)重影響測(cè)量結(jié)果，因此動(dòng)態(tài)光散射法更適用于單分散體系。而且動(dòng)態(tài)光散射法所得的結(jié)果強(qiáng)烈依賴于所應(yīng)用的數(shù)學(xué)算法。而采用納米顆粒跟蹤分析儀對(duì)不同粒徑范圍的囊泡進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，為了得到準(zhǔn)確的濃度和粒徑信息，需要根據(jù)所要測(cè)量的顆粒粒徑范圍對(duì)儀器分別校準(zhǔn)，操作繁瑣。受檢測(cè)靈敏度所限，納米顆粒跟蹤分析儀適用于粒徑范圍50nm～1μm的顆粒，粒徑小于50nm的外泌體無(wú)法檢測(cè)。除此...

外泌體的組成較為復(fù)雜，其內(nèi)含有多種生物大分子，如：核酸（雙鏈DNA和各種RNA亞型）、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)。這些分子被外泌體攜帶進(jìn)入血液循環(huán)，而后被靶細(xì)胞吸收，從而調(diào)節(jié)靶細(xì)胞基因表達(dá)和細(xì)胞功能。此外，外泌體相關(guān)的miRNA作為短單鏈和非編碼RNA分子，調(diào)節(jié)致病基因或抑病基因的表達(dá)，參與細(xì)胞分化、細(xì)胞凋亡及細(xì)胞信號(hào)的傳導(dǎo)。有研究表明，外泌體能影響種瘤微環(huán)境的形成、增強(qiáng)種瘤細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移能力、介導(dǎo)種瘤免疫壓制及參與種瘤放化療抵抗進(jìn)而促進(jìn)種瘤的發(fā)展。外泌體其純度與超離心法和PEG沉淀法提取外泌體做比較。外泌體合成在免疫系統(tǒng)中，淋巴細(xì)胞、樹(shù)突狀細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、肥大細(xì)胞等均可以產(chǎn)生外泌體。研究表明免疫細(xì)胞來(lái)源...

雖然系統(tǒng)遞送的外泌體主要在肝臟、腎臟和脾臟中積累，但通過(guò)在外泌體的外表面上展示特定的靶向分子。例如，識(shí)別靶抗原的肽或抗體片段，可以獲得靶向外泌體；通過(guò)在細(xì)胞分泌囊泡上展示糖基磷脂酰肌醇（GPI）錨定的納米抗體，可以使細(xì)胞分泌囊泡顯示多種蛋白，包括抗體、熒光蛋白和信號(hào)分子。自然分泌的外泌體分離純化直接作為藥物的潛力有限，但是，將自然的外泌體分泌所需組分摻入合成脂質(zhì)體或納米顆粒中，并且使用可控程序組裝后的工程化外泌體模擬物在藥學(xué)上擁有更大的應(yīng)用潛力。外泌體能夠影響級(jí)聯(lián)反應(yīng)的每一步，因此可作為病灶治理的靶點(diǎn)。植物外泌體提取試劑盒成分外泌體(Exosome)是由細(xì)胞分泌而來(lái)的微小囊泡，直徑約為30-2...

外泌體是指包含了復(fù)雜RNA和蛋白質(zhì)的小膜泡(30-150nm)，現(xiàn)今，其特指直徑在40-100nm的盤(pán)狀囊泡。多種細(xì)胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體。其主要來(lái)源于細(xì)胞內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體，經(jīng)多囊泡體外膜與細(xì)胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中。現(xiàn)在外泌體特指直徑在40-100nm的盤(pán)狀囊泡。多種細(xì)胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體。其主要來(lái)源于細(xì)胞內(nèi)內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體，經(jīng)多囊泡體外膜與細(xì)胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中。外泌體被認(rèn)為是疾病的生物標(biāo)志物和預(yù)后因子，具有重要的臨床診斷和治理意義。腹膜透析液外泌體miRNA測(cè)序已經(jīng)有許多關(guān)于外泌體作用的報(bào)導(dǎo)，根據(jù)這些現(xiàn)象實(shí)驗(yàn)中，從體液和培養(yǎng)上...

外泌體（exosome）是一種由活細(xì)胞分泌的，直徑約為40～160nm的具有雙層膜結(jié)構(gòu)的生物活性囊泡。它攜帶了分泌細(xì)胞包含的生物活性物質(zhì)，如DNA、miRNAs、mRNA、長(zhǎng)鏈非編碼RNA（LncRNA）、酶、蛋白質(zhì)和細(xì)胞代謝物等。外泌體在細(xì)胞間通信中扮演著十分重要的角色。目前對(duì)于外泌體的研究涉及包括瘤的發(fā)生和發(fā)展、侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制、瘤診斷標(biāo)志物以及藥物傳遞系統(tǒng)等諸多方面。外泌體是一個(gè)高度異質(zhì)性的群體，具有獨(dú)特的誘導(dǎo)復(fù)雜生物學(xué)反應(yīng)的能力。外泌體的異質(zhì)性可以根據(jù)其大小、含量(載物)、對(duì)受體細(xì)胞的功能影響以及細(xì)胞來(lái)源來(lái)區(qū)分。這些特征的不同組合導(dǎo)致了外泌體的復(fù)雜異質(zhì)性。外泌體由于包含的內(nèi)容物具有明顯的組...

外泌體(exosomes)是一類(lèi)由細(xì)胞分泌到胞外的囊泡。與其他兩種胞外囊泡(微囊泡和凋亡小體)相比，外泌體在產(chǎn)生方式、尺寸、密度和內(nèi)容物等方面存在明顯差異。不同于微囊泡“出芽”的形成方式，外泌體主要通過(guò)胞吐過(guò)程釋放至細(xì)胞外:首先細(xì)胞膜向內(nèi)凹陷形成早期核內(nèi)體(earlyendosomes)，早期核內(nèi)體進(jìn)一步內(nèi)陷形成多泡體(multivesicularbodies，MVBs)，其中一部分多泡體與溶酶體(lysosome)融合，進(jìn)而降解;另一部分與細(xì)胞膜融合，將其內(nèi)部所包含的囊泡釋放至胞外，即為外泌體。外泌體具有獨(dú)特的物理化學(xué)性質(zhì)，其直徑為30～200nm，密度為1.13～1.19g/mL，組成包括...

外泌體中存在著某些特定的蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和多糖,基于抗原–抗體特異性識(shí)別和結(jié)合作用原理,可將外泌體從其他組分中分離出來(lái)。四次跨膜蛋白家族、脂膜、膜聯(lián)蛋白、上皮細(xì)胞黏附分子或肝素等都可以作為抗原,而捕獲外泌體的抗體可以附著在平板、磁珠、二氧化硅、樹(shù)脂、膜親和過(guò)濾器、纖維素濾膜、聚酰氨基胺樹(shù)狀聚合物表面和微流控器件上。常用方法有酶聯(lián)免疫吸附法和磁珠法等。酶聯(lián)免疫吸附法使用聚苯乙烯微孔板作為抗體附著介質(zhì),其結(jié)果用吸光度值表示,該方法可以快速分析已知表面生物標(biāo)志物的表達(dá),也可以瞬時(shí)讀出外泌體的產(chǎn)量和特異性。磁珠法多使用共價(jià)包覆鏈霉親和素的磁珠,與樣品一起孵育后可通過(guò)磁泳將被結(jié)合的外泌體從樣品組分中分離出來(lái)...

小鼠骨髓樹(shù)突狀細(xì)胞產(chǎn)生的外泌體中含有的中流多肽能夠啟動(dòng)特異性細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞，根除或抑制小鼠中流的生長(zhǎng)，這一發(fā)現(xiàn)為中流免疫zhiliao提供了新的研究思路。另外，樹(shù)突狀細(xì)胞來(lái)源的外泌體也能夠通過(guò)激huo其他免疫細(xì)胞誘導(dǎo)抗中流反應(yīng)，從而抑制中流。B細(xì)胞分泌的外泌體包含MHCⅡ-多肽復(fù)合物，能夠激huo人和小鼠抗原特異性T細(xì)胞，從而實(shí)現(xiàn)調(diào)節(jié)免疫響應(yīng)的功能。細(xì)菌或病原體感ran的巨噬細(xì)胞外泌體能夠刺激巨噬細(xì)胞和中性粒細(xì)胞分泌炎性介質(zhì)，在增強(qiáng)機(jī)體免疫監(jiān)督方面發(fā)揮重要作用。外泌體提純方法中，超速離心法和聚合物沉淀法（市售試劑盒）混入多種雜質(zhì)。外泌體是什么提取的外泌體有很多潛在優(yōu)勢(shì)，但是外泌體在藥物遞送...

與PC-3細(xì)胞相比，PC-3細(xì)胞外泌體中含有較高豐度的鞘糖脂、鞘磷脂、膽固醇和磷脂酰絲氨酸。外泌體常見(jiàn)的表面蛋白質(zhì)包括四跨膜蛋白(如CD63、CD9、CD81)、黏附蛋白(如L1CAM、LAMP2)、整合素和糖蛋白(如纖連蛋白)等，而外泌體囊泡內(nèi)蛋白質(zhì)則與來(lái)源細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)密切相關(guān)，包含例如熱休克蛋白(HSP70、HSP90)和細(xì)胞骨架蛋白(actin、tubulin、cofilin)等。除此之外，外泌體中還攜帶有來(lái)源細(xì)胞的miRNAs、mRNAs、non-codingRNAs、circularRNAs和DNA等遺傳物質(zhì)。外泌體的完整囊泡結(jié)構(gòu)能夠保護(hù)其內(nèi)部生物分子不受體液中各種酶的影響從而保持...

外泌體含有的信號(hào)分子能反映分泌細(xì)胞的生理狀態(tài)和功能狀態(tài),甚至還會(huì)包含細(xì)胞病態(tài)相關(guān)的分子信息,從而提供了豐富的潛在的生物標(biāo)志物分子源。瘤細(xì)胞分泌的外泌體通過(guò)對(duì)大分子物質(zhì)的轉(zhuǎn)移和傳遞調(diào)節(jié)臨近或遠(yuǎn)處瘤生長(zhǎng)的微環(huán)境,對(duì)促瘤生成及瘤增生、轉(zhuǎn)移發(fā)揮著不同的調(diào)節(jié)作用。瘤細(xì)胞分泌的外泌體還可以通過(guò)誘導(dǎo)耐藥和免疫抑制來(lái)促進(jìn)瘤的發(fā)展。外泌體能在4℃保存96h,或是在-70℃下保存更長(zhǎng)時(shí)間,這些特點(diǎn)使得外泌體可應(yīng)用于瘤的早期診斷和預(yù)后判斷。靶向瘤的外泌體的標(biāo)志物可能為瘤疾病的診斷和治理提供新的指標(biāo)和途徑,對(duì)高危人群早期診斷和早期治理以降低或減緩瘤病例的發(fā)生上發(fā)揮著重要的作用。近些年關(guān)于外泌體研究很普遍。瑞黎菲外泌體...

在多細(xì)胞生物體內(nèi)，遠(yuǎn)處的細(xì)胞可以通過(guò)傳遞單個(gè)分子或細(xì)胞外囊泡（EVs，包括exosomes和microvesicles等）交換信息。該綜述介紹了一些EVs引人注目的功能，以及我們目前對(duì)其生理作用認(rèn)識(shí)的局限。盡管有初步研究表明，EVs在體內(nèi)具有一些生理功能，但EVs的本質(zhì)特性仍有待進(jìn)一步澄清。這篇綜述主要關(guān)注種瘤細(xì)胞和微環(huán)境，但類(lèi)似的結(jié)果和挑戰(zhàn)也適用于EVs介導(dǎo)的其他的病理/生理過(guò)程。功能神經(jīng)的能力和完整性需要感覺(jué)運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元、神經(jīng)元和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞之間的交互式信息交流。外泌體的異質(zhì)性可以根據(jù)其大小、含量(載物)、對(duì)受體細(xì)胞的功能影響以及細(xì)胞來(lái)源來(lái)區(qū)分。細(xì)胞上清外泌體融合實(shí)驗(yàn)通過(guò)改變外泌體的溶解性或...

外泌體有很多潛在優(yōu)勢(shì)，但是外泌體在藥物遞送中的應(yīng)用研究才剛剛起步，尚有許多問(wèn)題需解決：如何修飾外泌體的靶向性：缺氧瘤細(xì)胞來(lái)源的外泌體傾向于向缺氧瘤組織內(nèi)募集；此外，還可通過(guò)在外泌體膜表面設(shè)計(jì)與靶細(xì)胞特異性結(jié)合的抗體、配體或受體來(lái)實(shí)現(xiàn)。如何提高藥物裝載效率：目前主要有①前裝載方法（首先將藥物加載到母細(xì)胞中，隨后外泌體形成并包裹藥物分泌到細(xì)胞外，常用的方法如轉(zhuǎn)染、共孵育等）；②后裝載方法（直接將藥物加載到外泌體中，例如孵育、電穿孔、超聲、擠出、凍融循環(huán)等）；③其他裝載方法（主要是通過(guò)生物工程修飾母細(xì)胞來(lái)實(shí)現(xiàn)）。如何實(shí)現(xiàn)外泌體的大量生產(chǎn)：目前大規(guī)模生產(chǎn)外泌體的方法主要是自發(fā)生產(chǎn)和非自發(fā)生產(chǎn)。結(jié)果表明...

作用機(jī)制主要是旁分泌的間充質(zhì)干細(xì)胞（MSC）被普遍地用于醫(yī)治各種人類(lèi)疾病。已經(jīng)證明沒(méi)有一個(gè)因素足以調(diào)解MSC的醫(yī)治效果。然而，由許多細(xì)胞（包括MSC）分泌的外泌體膜囊泡是有吸引力的候選物作為其功效的載體。外泌體可以運(yùn)輸和運(yùn)送大量的蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和核酸，并可以改變細(xì)胞和身體部位的功能。除了作為細(xì)胞間通訊的關(guān)鍵作用之外，外泌體越來(lái)越多地被認(rèn)為是疾病的生物標(biāo)志物和預(yù)后因子。此外，它們有潛力被用作臨床應(yīng)用基因和藥物遞送的載體。該文回顧了外泌體的生物發(fā)生、分子組成及其作為細(xì)胞間通訊的信使的作用，著重于其作為干細(xì)胞醫(yī)治的載體的潛力。外泌體的異質(zhì)性可以根據(jù)其大小、含量(載物)、對(duì)受體細(xì)胞的功能影響以及細(xì)胞來(lái)源...

間充質(zhì)干細(xì)胞存在于骨髓、脂肪、臍血、牙髓、滑膜液等部位，是一種能夠自我更新的多功能干細(xì)胞。間充質(zhì)干細(xì)胞通過(guò)旁分泌的形式發(fā)揮其生理功能，而外泌體作為一種細(xì)胞間傳遞信息的介質(zhì)，在間充質(zhì)干細(xì)胞的功能行使中發(fā)揮了重要作用。研究發(fā)現(xiàn)間充質(zhì)干細(xì)胞來(lái)源的外泌體能夠修復(fù)組織損傷、抑制中流生長(zhǎng)和調(diào)節(jié)免疫響應(yīng)，具有zhiliao心肌梗死、自身免疫疾病、阿爾茲海默癥等疾病的潛力。另外，也有研究顯示間充質(zhì)干細(xì)胞來(lái)源的外泌體會(huì)促進(jìn)某些中流生長(zhǎng)。各種細(xì)胞粘著分子在外泌體膜表面表達(dá)，由其決定外泌體被運(yùn)輸往哪一種細(xì)胞。血漿血清提取試劑盒成分外泌體（Exosome），是細(xì)胞外囊泡（EV）的一種主要類(lèi)型，是直徑為30至150nm...

外泌體的形成始于細(xì)胞內(nèi)陷，成熟于多囊泡胞內(nèi)體，終于膜融合。細(xì)胞通過(guò)內(nèi)吞作用產(chǎn)生小囊泡，小囊泡融合形成早期胞內(nèi)體（earlyendosome），在多個(gè)蛋白的協(xié)同調(diào)控下，早期胞內(nèi)體出芽形成含有多個(gè)腔內(nèi)小囊泡的多泡體（multivesicularbodies，MVB），這個(gè)過(guò)程中這些腔內(nèi)小囊泡（intraluminalvesicles，ILVs）會(huì)裝載各種核酸和蛋白質(zhì)等分子，泡內(nèi)體較后在GTPase家族中RAB酶的調(diào)節(jié)下與細(xì)胞膜融合。隨后，這些小囊泡會(huì)被釋放到細(xì)胞外，稱(chēng)為外泌體。外泌體是通過(guò)細(xì)胞內(nèi)吞細(xì)胞膜融合主動(dòng)排除的物質(zhì)，大小均勻，而微泡是由細(xì)胞直接出芽脫落生成，大小不均一。抗體親和法和密度梯度離...

在外泌體中引入藥物的方式包括體內(nèi)裝載和體外裝載兩種。體內(nèi)藥物裝載可以通過(guò)傳統(tǒng)方法(如病毒轉(zhuǎn)染、脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染或電穿孔等)轉(zhuǎn)染來(lái)源細(xì)胞，編碼感興趣的RNA或蛋白質(zhì)，也可以使藥物與來(lái)源細(xì)胞共混，使細(xì)胞分泌產(chǎn)生含有目標(biāo)生物分子的外泌體。體外藥物裝載則首先需要得到純化的外泌體，然后將感興趣的藥物通過(guò)電穿孔或脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染等方法裝入純化的外泌體。外泌體內(nèi)可裝載的藥物包括小分子化學(xué)藥物、蛋白質(zhì)和多肽、核酸藥物、天然產(chǎn)物等。因外泌體內(nèi)含mRNA、microRNA等核酸和蛋白質(zhì)對(duì)相鄰細(xì)胞具有交換信息的功能。外泌體與細(xì)胞因子風(fēng)暴細(xì)胞分泌到細(xì)胞外環(huán)境中分別稱(chēng)為外泌體和微泡的細(xì)胞外膜泡是內(nèi)源性和質(zhì)膜起源的不同類(lèi)型的膜囊泡。...

外泌體即細(xì)胞分泌的直徑約40-100nm的微小膜泡，多種細(xì)胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體。一開(kāi)始被當(dāng)做細(xì)胞排泄物，但是近幾年，研究發(fā)現(xiàn)外泌體可謂是小身體大作用。種瘤發(fā)生轉(zhuǎn)移后，如何靶向呈遞藥物一直是種瘤醫(yī)治中的一個(gè)巨大挑戰(zhàn)。發(fā)表于NanoLett的一項(xiàng)研究中，研究人員利用外泌體制備藥物的遞送系統(tǒng)（LD-MDS），并取得成功。在這項(xiàng)研究中，研究人員將相關(guān)藥物錨定在活巨噬細(xì)胞膜上，細(xì)胞自身相關(guān)蛋白酶響應(yīng)開(kāi)啟并將藥物轉(zhuǎn)載進(jìn)入外泌體，順利遞送至肺轉(zhuǎn)移灶并且轉(zhuǎn)化為納米囊泡和次級(jí)納米囊泡，促進(jìn)轉(zhuǎn)移性4T1病細(xì)胞的有效內(nèi)化和細(xì)胞死亡。之后，受損的4T1病細(xì)胞可以釋放次級(jí)納米囊泡和游離藥物分子，再破壞鄰近...

尺寸排除色譜法是使用聚合物凝膠或類(lèi)似的固定相柱進(jìn)行外泌體分離的技術(shù),樣品以重力滴落的方式收集。流體力學(xué)半徑較小的樣品組分進(jìn)入凝膠孔隙后,需耗費(fèi)相對(duì)較長(zhǎng)的時(shí)間通過(guò)凝膠柱,導(dǎo)致延遲洗脫,實(shí)現(xiàn)不同粒徑大小顆粒分離。尺寸排除色譜法可以與差速離心法結(jié)合而不會(huì)明顯損失外泌體,保證產(chǎn)量的同時(shí)可有效去除雜質(zhì)蛋白,更適合目標(biāo)蛋白質(zhì)組學(xué)和miRNA的分析。靜水過(guò)濾透析法主要利用靜水壓力迫使樣品中不同特定大小分子先后通過(guò)透析管,其中溶劑和小溶質(zhì)很容易通過(guò)透析管,而較大的顆粒,如外泌體和其他囊泡,仍留在透析管中而被收集。利用外泌體將siRNA和抗藥劑等運(yùn)輸?shù)侥繕?biāo)細(xì)胞中。唾液提取試劑盒銷(xiāo)售事實(shí)上，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明：在小鼠急...

Exosome（外泌體）是由活細(xì)胞分泌小囊泡，具有典型的脂質(zhì)雙分子層結(jié)構(gòu)；參與細(xì)胞之間的交流，物質(zhì)的運(yùn)輸以及正常生理過(guò)程的維持，此外還與疾病的產(chǎn)生有關(guān)。對(duì)分離的外泌體進(jìn)行體外標(biāo)記或示蹤，有助于對(duì)外泌體的功能進(jìn)行進(jìn)一步的研究。目前對(duì)于外泌體的標(biāo)記方法有很多種，包括親脂性的染料和膜滲透型的化合物等。PKH67的體內(nèi)熒光半衰期為10-12天。相比于PKH-67，PKH-26具有更長(zhǎng)的半衰期，標(biāo)記在兔紅細(xì)胞上的PKH26半衰期長(zhǎng)達(dá)100天以上。特別適用于體外增殖研究以及長(zhǎng)期的體內(nèi)細(xì)胞跟蹤研究。外泌體主要來(lái)源于細(xì)胞內(nèi)內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體，經(jīng)多囊泡體外膜與細(xì)胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中 。提取試劑...

膜封閉的囊泡釋放到周?chē)h(huán)境中已經(jīng)成為近幾年來(lái)越來(lái)越受關(guān)注的問(wèn)題。令人信服的證據(jù)表明囊泡可交換復(fù)雜的信息有助于這種興趣的興起。但是，也已經(jīng)清楚，不同類(lèi)型的分泌囊泡共存，具有不同的細(xì)胞內(nèi)起源和形成模式，因此可能具有不同的組成和功能。外泌體是分泌囊泡的一種亞型。它們?cè)谡婧思?xì)胞內(nèi)的多泡小體中形成，并且當(dāng)這些多泡小體與質(zhì)膜融合時(shí)分泌到細(xì)胞外。有趣的是，不同的分子家族已被證明參與細(xì)胞內(nèi)形成外泌體及其隨后的分泌，這表明即使在外泌體中也存在不同的亞型。有報(bào)導(dǎo)指出，外泌體內(nèi)miRNA參與促進(jìn)血管新生、抗癥性和促進(jìn)膠原蛋白沉淀等一系列過(guò)程。江蘇CD9外泌體慢病毒包裝科學(xué)家也嘗試?yán)猛饷隗w的壓制發(fā)病機(jī)制功能。例如，...

外泌體不只可作為疾病診斷的生物標(biāo)志，而且可作為天然的藥物傳遞載體。外泌體能夠負(fù)載的治理物質(zhì)包括小分子化合物、蛋白質(zhì)、寡核苷酸等，且在體液中寬泛分布且具有定向歸巢能力。外泌體獨(dú)特的生物兼容性、高穩(wěn)定性、瘤靶向性使其在未來(lái)瘤治理中有很大的利用價(jià)值。外泌體能夠裝載的治理物質(zhì)包括小分子化合物、蛋白質(zhì)、寡核苷酸等。作為小分子化合物載體，外泌體裝載姜黃素、紫杉醇、阿霉素等主要是用于抗瘤研究；已經(jīng)發(fā)現(xiàn)外泌體可遞送多種蛋白質(zhì)，例如酶，細(xì)胞骨架蛋白質(zhì)和跨膜蛋白質(zhì)；外泌體作為核酸分子的藥物載體主要用于基因治理，外泌體天然的可以攜帶遺傳（例如miRNA，siRNA）到靶細(xì)胞中，從而在生物學(xué)和致病過(guò)程中誘導(dǎo)遺傳修飾。...

Knepper等通過(guò)對(duì)透射電鏡得到的200個(gè)囊泡進(jìn)行粒徑分析，結(jié)果表明尿液中外泌體的粒徑分布約為35～40nm，磷脂雙分子層厚度約為直徑的1/5～1/10。透射電鏡結(jié)合免疫金標(biāo)記法能夠得到外泌體表面特征分子的信息，有助于揭示外泌體的產(chǎn)生機(jī)制與來(lái)源。動(dòng)態(tài)光散射(dynamiclightscattering，DLS)和納米顆粒跟蹤分析(nanoparticletrackinganaly[1]sis，NTA)都是利用光學(xué)手段獲得囊泡粒徑分布的方法。兩者的不同之處在于動(dòng)態(tài)光散射通過(guò)檢測(cè)散射光的強(qiáng)度計(jì)算得到顆粒粒徑，而納米顆粒跟蹤分析通過(guò)追蹤單個(gè)粒子的運(yùn)動(dòng)軌跡計(jì)算得到樣品濃度、粒徑分布等信息。不同肝臟疾...

外泌體（Exosome）是一種直徑為30-100nm的納米級(jí)脂質(zhì)包裹體結(jié)構(gòu)，內(nèi)部包裹了蛋白、mRNA和microRNA等物質(zhì)。外泌體由細(xì)胞分泌釋放出來(lái)，在血液等體液內(nèi)傳播，較后又可被其他細(xì)胞吞噬，是細(xì)胞間通訊的重要介質(zhì)。源自于間充質(zhì)干細(xì)胞內(nèi)分泌的外泌體，富含一百多種胞外基質(zhì)蛋白，mRNA信使核糖核酸和多重生長(zhǎng)因子。在臨床上，干細(xì)胞外泌體主要治理燒傷、燙傷、皮膚潰瘍，再生健康皮膚；在護(hù)膚方面，主要是對(duì)外傷受損、衰老中毒皮膚進(jìn)行修復(fù)，比較全的調(diào)理皮膚、改善膚質(zhì)，令肌膚恢復(fù)年輕、健康的狀態(tài)。血液中的成纖維細(xì)胞所釋放的外泌體，可以促進(jìn)角質(zhì)形成細(xì)胞的移動(dòng)和增殖以及血管新生來(lái)促進(jìn)傷口愈合。上海CD81外泌...

外泌體有很多潛在優(yōu)勢(shì)，但是外泌體在藥物遞送中的應(yīng)用研究才剛剛起步，尚有許多問(wèn)題需解決：如何修飾外泌體的靶向性：缺氧瘤細(xì)胞來(lái)源的外泌體傾向于向缺氧瘤組織內(nèi)募集；此外，還可通過(guò)在外泌體膜表面設(shè)計(jì)與靶細(xì)胞特異性結(jié)合的抗體、配體或受體來(lái)實(shí)現(xiàn)。如何提高藥物裝載效率：目前主要有①前裝載方法（首先將藥物加載到母細(xì)胞中，隨后外泌體形成并包裹藥物分泌到細(xì)胞外，常用的方法如轉(zhuǎn)染、共孵育等）；②后裝載方法（直接將藥物加載到外泌體中，例如孵育、電穿孔、超聲、擠出、凍融循環(huán)等）；③其他裝載方法（主要是通過(guò)生物工程修飾母細(xì)胞來(lái)實(shí)現(xiàn)）。如何實(shí)現(xiàn)外泌體的大量生產(chǎn)：目前大規(guī)模生產(chǎn)外泌體的方法主要是自發(fā)生產(chǎn)和非自發(fā)生產(chǎn)。外泌體不...