外泌體研究背景：胞外囊泡是從細胞膜上脫落或者由細胞分泌的具有雙層膜結構的囊泡狀小體，主要由微囊泡、凋亡小體、外泌體組成。而外泌體是其中一類小囊泡，直徑為30~150nm，密度1.10~1.18g/ml，可攜帶核酸、蛋白質質和脂質等，存在于血液、唾液、尿液等多種體液中。越來越多的研究證實，外泌體可以通過細胞間轉移核酸、蛋白質、脂質等特定物質，發(fā)揮特殊的功能。如在抗原提呈細胞中呈遞抗原程中、腫細胞細胞發(fā)生了發(fā)展、神經細胞信號轉導過程中都發(fā)揮著重要作用。對外泌體的分析和檢測可以輔助疾病的早期診斷、療效評價和預后分析。外泌體可通過其攜帶的蛋白質、核酸、脂類等來調節(jié)受體細胞的生物學活性。在免疫系統(tǒng)中，據(jù)報道趨化因子受體CCR5通過外泌體在細胞之間轉移是細胞人類免疫缺陷病毒傳染的一種機制。福建外泌體芯片

外泌體作為疾病診斷的標志物具有其獨特優(yōu)勢:(1)與正常細胞相比，病變細胞產生的外泌體在分泌量和內容物方面存在明顯差異。病變的細胞和組織能夠產生更多外泌體。(2)由于特殊的生成方式，外泌體的組成不同于來源細胞。其內包含的一些特異性蛋白質能夠揭示外泌體的起源、結構和運輸方式，有利于深入了解外泌體的產生機制。(3)病變細胞分泌的外泌體通過胞吐的過程進入血液、尿液等體液，囊泡狀結構能夠保護外泌體內部生物分子不受體液中蛋白酶、磷酸酶、核酸酶等干擾，有利于保持其結構完整和生物活性，通過對此類體液進行分析可以實現(xiàn)疾病的無創(chuàng)或微創(chuàng)檢測。血液外泌體粒徑檢測外泌體不只可作為疾病診斷的生物標志，而且可作為天然的藥物傳遞載體。

外泌體調控毛發(fā)根部的囊干細胞的機能，延長毛發(fā)根部的囊生長期，同時活化處于靜止期的毛發(fā)根部的囊，使其提前進入新的生長周期，實現(xiàn)了毛發(fā)的再次生長。骨衰老小鼠注射外泌體試驗證明：年輕血液中的外泌體同樣使衰老的組織重新煥發(fā)生機。來源于脂肪組織中的干細胞分泌一些信號分子和生長因子，可以促使控制毛發(fā)根部的囊生長周期的毛發(fā)根部的囊干細胞進行分化，向上遷移生成表皮細胞和皮脂腺，向下遷移生成毛母細胞。毛發(fā)根部的囊的生長周期決定毛發(fā)的生長周期，而毛發(fā)根部的囊干細胞的機能決定了毛發(fā)根部的囊的活躍程度，外泌體靶向調控毛發(fā)根部的囊干細胞的功能。

流式細胞技術針對外泌體的表面抗原標記物進行檢測，能夠實現(xiàn)外泌體的高通量、多通道分析。但是由于外泌體的粒徑小、折射率低，所以采用常規(guī)的流式細胞儀進行檢測時往往需要將外泌體與beads連接以增大表面積、增強反射，操作耗時又費力。Tian等搭建了一種高靈敏度的流式細胞儀(HSFCM)，將可檢測的外泌體粒徑降至40nm，能夠在不連接beads的情況下實現(xiàn)每分鐘10000個外泌體的檢測，并且能夠結合免疫熒光的方法進行外泌體標志蛋白質的定量檢測，目前該儀器已商品化。外泌體被工程化改造后，具有靶向特定細胞類型或組織的功能。

外泌體作為細胞間信使較早發(fā)現(xiàn)于體外培養(yǎng)的綿羊紅細胞上清液中，是直徑為30~150nm，密度為1.10~1.18g/ml的細胞外囊泡，攜帶豐富的遺傳信息，參與細胞信號轉導、細胞遷移、瘤子新生血管生長和瘤子微環(huán)境形成等過程。由于現(xiàn)存的分離技術是基于外泌體的大小、結構和膜蛋白的親和捕獲，比較難完全將其與其他囊泡和大分子蛋白質復合體區(qū)分開，分離出的外泌體蛋白濃度通常會被高估，并且不同亞型外泌體之間可能會有不同蛋白質特征，所以對分離的外泌體進行鑒定對于后期研究至關重要。外泌體作為核酸的藥物遞送載體。細胞外泌體通用技術要求下載

所有培養(yǎng)的細胞類型均可分泌外泌體。福建外泌體芯片

血清和血漿為常規(guī)檢測樣本，具有微創(chuàng)取樣的優(yōu)點，是診斷疾病的理想樣本。血液中外泌體能夠作為胰腺ai、胃ai、肺ai和阿爾茲海默等疾病的早期診斷和療效評價提供潛在標志物。血液外泌體來源的疾病標志物主要包括蛋白質和miRNA兩類。Melo等發(fā)現(xiàn)利用胰腺ai細胞外泌體表面的磷脂酰肌醇聚糖-1(GPC1)能夠實現(xiàn)胰腺ai早期診斷，利用該方法對血清中包含GPC1的外泌體進行檢測，能夠高特異性(100%)、高靈敏度(100%)地區(qū)分胰腺ai患者(246例)和正常人(20例)以及慢性胰腺炎患者(37例)。福建外泌體芯片

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